Chương 200: 35%

[101-200] Điều kiện phòng thí nghiệm của trường không được tốt lắm.

Điều hòa cũ kỹ, không gian không lớn, trong phòng người cũng hơi đông.

Điều kiện coi như là gian khổ đi, nhưng mọi người lại không hề cảm thấy mệt mỏi, ai nấy đều nhiệt huyết sục sôi, chỉ muốn nhanh chóng làm ra dự án này.

Lần trước Trần Hạo có động lực như vậy là vào mùa hè năm hai, cùng Giang Hà đi tham gia giải đấu CS1. 6 do quán net tổ chức.

Vật đổi sao dời.

Thiếu niên nghiện net M4 ngày nào, bây giờ đã biến thành cao thủ sử dụng micropipette rồi.

Thái Trác Quần hút nước không có enzyme ra, bơm vào đáy ống ly tâm, thổi hút nhiều lần.

Vương Hiểu Tình quan sát một lát rồi nói: "Đo thử xem."

Thái Trác Quần gật đầu, rút đầu tip ra, cầm mẫu vật đi đến trước máy quang phổ kế NanoDrop.

Dùng micropipette hút 1 microliter mẫu vật, nhỏ lên bệ kiểm tra, hạ tay đòn kiểm tra xuống, nhấp vào đo lường trên chiếc máy tính để bàn cũ kỹ được kết nối.

Trên màn hình rất nhanh đã nhảy ra dữ liệu.

Lục Hiểu Lâm dừng công việc trong tay, quay đầu hỏi: "Bao nhiêu?"

Thái Trác Quần: "Nồng độ 12ng/ul, tỷ lệ A260/280 là 1. 32, tỷ lệ A260/230 là 0. 7."

Vương Hiểu Tình nhìn chằm chằm vào màn hình một lúc, có chút bất lực: "Đây đã là lô mẫu hỏng thứ tư rồi..."

Độ khó của dự án vượt xa dự đoán của tất cả mọi người ngoại trừ Giang Hà.

Mặc dù trước đó Giang Hà đã dùng phương pháp thêm DMSO, giải quyết được vấn đề dimer mồi trong giai đoạn khuếch đại PCR.

Nhưng giải quyết được một vấn đề, tiếp theo sẽ còn xuất hiện nhiều vấn đề hơn nữa...

Nút thắt hiện tại, bị kẹt ở khâu chiết xuất.

Hàm lượng miRNA trong máu cực kỳ thấp, và rất dễ bị enzyme RNA trong máu phân hủy.

Độ tinh khiết không đủ.

Tỷ lệ A260/280 bình thường phải nằm trong khoảng từ 1. 8 đến 2. 0, thấp hơn 1. 8 có nghĩa là trong mẫu vật tồn tại một lượng lớn ô nhiễm protein.

Còn tỷ lệ A260/230 chỉ có 0. 7, càng chứng tỏ bên trong lẫn một lượng lớn các chất phenol hoặc ion muối.

Dùng loại mẫu vật này để làm bước phiên mã ngược tiếp theo, tạp chất sẽ làm enzyme phiên mã ngược mất hoạt tính, khuếch đại PCR phía sau căn bản không thể chạy ra dữ liệu thực.

Thái Trác Quần cố gắng tìm nguyên nhân: "Giáo sư Vương, có phải lượng chloroform dùng không đủ không? Lúc chúng ta lấy dịch nổi, có thể vẫn mang theo một số protein ở lớp giữa."

Vương Hiểu Tình lắc đầu: "Lô trước chúng ta đã tăng tỷ lệ chloroform lên hai mươi phần trăm, thời gian ly tâm cũng kéo dài thêm năm phút, độ tinh khiết có tốt hơn một chút, nhưng nồng độ trực tiếp rớt xuống dưới 5ng/ul."

Lục Hiểu Lâm phân tích ở một bên: "Trong huyết thanh toàn là protein, axit nucleic tự do ít, phương pháp chiết xuất Trizol, dùng trên huyết thanh, bẩm sinh đã có khiếm khuyết."

Mọi người trong phòng thí nghiệm, chìm vào im lặng.

Thực ra ở đời sau, có bộ kit thương mại phương pháp cột chiết xuất chuyên dụng cho huyết thanh, thao tác kiểu ngốc nghếch, nửa giờ là có thể thu được miRNA độ tinh khiết cao.

Nhưng năm 2008, bộ kit chuyên dụng cho sinh thiết lỏng căn bản không thể mua được trong nước, cho dù mua được thì công nghệ vẫn còn lâu mới trưởng thành, cho nên chỉ có thể dùng các hóa chất cơ bản nhất, làm thủ công từng bước một.

Thái Trác Quần hỏi: "Giáo sư Vương, có cách nào không?"

Vương Hiểu Tình: "Đừng hỏi tôi, Giang Hà đâu? Giang Hà đi đâu rồi?"

Trần Hạo giơ tay: "Giang Hà nói có chút việc, quay lại ngay."

Vương Hiểu Tình: "Vậy mọi người dừng lại một chút đi, nghỉ ngơi mười phút."

Giáo sư Hiểu Tình bây giờ cũng học được cách khôn ngoan rồi.

Tự mình khổ sở nghiên cứu nửa ngày, không bằng Giang Hà quay lại một câu nói trực tiếp giải quyết.

Thay vì lãng phí tế bào não, thà nghỉ ngơi một chút, bảo toàn thể lực...

Lúc mọi người ra ngoài nghỉ ngơi.

Dịch Hướng Vãn và Cố Diệc Chu đi mua nước cho mọi người.

Trên đường đi, Dịch Hướng Vãn hiếm khi không nói đùa, có chút sầu não nói:

"Đàn anh, anh nói xem dự án này của chúng ta, rốt cuộc có thành công được không?"

Cố Diệc Chu liếc nhìn cậu ta: "Sao vậy? Không muốn làm nữa à?"

"Ây da, thì chắc chắn không phải rồi, chỉ là... em đang nghĩ một chuyện, lùi một vạn bước mà nói, cho dù hôm nay chúng ta giải quyết được vấn đề độ tinh khiết chiết xuất, cho dù hệ thống phiên mã ngược, PCR tiếp theo toàn bộ đều được giải quyết, rồi sao nữa?"

Cố Diệc Chu nhíu mày.

Dịch Hướng Vãn nói tiếp: "Chúng ta làm sao để xác minh đây? Đã là tầm soát sớm ung thư tuyến tụy, vậy đến cuối cùng, để xác minh mô hình có hiệu quả hay không, chúng ta cần mẫu vật của bệnh nhân thực sự đúng không?"

"Hơn nữa, thứ chúng ta cần là [máu của bệnh nhân trông có vẻ hoàn toàn khỏe mạnh, nhưng thực chất vừa mới mắc ung thư tuyến tụy giai đoạn cực sớm]."

Thực ra vấn đề này, mấy thành viên nòng cốt trong nhóm đều đã từng nghĩ tới.

Chỉ là mọi người đều đang cắm đầu làm việc, không ai chọc thủng nó.

Bởi vì tính ẩn nấp của ung thư tuyến tụy cực kỳ cao.

Khi bệnh nhân vì đau bụng, vàng da mà đến bệnh viện khám, thường đã là giai đoạn giữa và cuối rồi.

Ung thư tuyến tụy giai đoạn cực sớm, bản thân bệnh nhân không có bất kỳ triệu chứng nào, khám sức khỏe định kỳ cũng không phát hiện ra.

Cho nên, muốn lấy được loại mẫu vật này, con đường duy nhất là dựa vào ngân hàng mẫu sinh học huyết thanh hoàn thiện.

Tức là bệnh viện lưu trữ lâu dài một lượng lớn huyết thanh của nhóm người khám sức khỏe, vài năm sau, khi một số người trong đó được chẩn đoán mắc ung thư tuyến tụy, các nhà nghiên cứu mới tìm lại huyết thanh của họ khi còn ở trạng thái khỏe mạnh vài năm trước, dùng để kiểm tra mô hình tầm soát sớm của Giang Hà, xem có thể phát hiện ra sự gia tăng miRNA bất thường trong máu vài năm trước hay không.

Nhưng thực tế là, Trung Quốc năm 2008, không có bệnh viện nào sở hữu ngân hàng mẫu sinh học huyết thanh chất lượng cao hoàn thiện như vậy.

Hiệp Hòa cũng không có.

"Cho nên, nếu không tìm được dữ liệu xác minh, dữ liệu xác minh sẽ không có ý nghĩa..."

"Uống gì?" Cố Diệc Chu ngắt lời cậu ta.

"Hả? Ồ, ờ, cola đi, cola là được rồi."

Dịch Hướng Vãn nhận lấy lon cola lạnh, lăn một vòng trên cổ mình, thật mát.

Sau đó cậu ta nói: "đàn anh, em nói cái này không phải có ý đả kích sếp, ý em là..."

"Được rồi, đừng giải thích nữa, nghĩ nhiều như vậy làm gì? Những vấn đề này là sếp cần phải cân nhắc, nhiệm vụ hiện tại của chúng ta là vượt qua ải chiết xuất này. Đừng để đến cuối cùng, sếp từ châu Âu, từ Na Uy, từ Mỹ tìm được mẫu vật về rồi, kết quả chúng ta ngay cả RNA cũng không chiết xuất ra được, thế mới gọi là mất mặt."

"Đệt, cũng đúng ha! Quả thực là nghĩ hơi nhiều rồi..."

Hai người mang nước trở lại phòng thí nghiệm.

Phát hiện Giang Hà đã quay lại, đang đứng trước màn hình NanoDrop.

Hơn nữa Giáo sư Vương đang ngoan ngoãn báo cáo tình hình:

"Độ tinh khiết không tăng lên được, hạn chế của Trizol, hàm lượng protein trong huyết thanh vượt xa mô, lúc hút dịch nổi, không thể tránh khỏi việc mang theo tạp chất. Nếu muốn tránh mang theo tạp chất, thì chỉ có thể hút một lượng nhỏ chất lỏng ở lớp bề mặt nhất, nhưng như vậy nồng độ RNA lại không đạt yêu cầu của PCR ở hạ nguồn, làm sao bây giờ?"

Giang Hà điềm nhiên nói: "Chẳng phải đã nói với mọi người từ sớm rồi sao? Thêm glycogen."

Mọi người trong phòng thí nghiệm đều sửng sốt một chút.

Thành viên cũ mặc dù đã nghe Giang Hà nói về chuyện này, nhưng mọi người đều không biết cụ thể nên thực hiện như thế nào...

"Ồ, trách tôi, nói chưa đủ chi tiết."

Giang Hà sau đó giải thích: "Trước khi thêm isopropanol để kết tủa, hãy thêm 5 microliter glycogen nồng độ 5mg/ml vào pha nước làm chất đồng kết tủa. Nó không chỉ có thể làm chất mang giúp lượng RNA cực nhỏ tập hợp kết tủa, mà còn có thể làm cho khối kết tủa hình thành cuối cùng trở nên có thể nhìn thấy bằng mắt thường, thuận tiện cho việc rửa sau đó, giảm thiểu thất thoát."

Lục Hiểu Lâm suy nghĩ một chút, đưa ra thắc mắc: "Nhưng điều này không giải quyết được vấn đề tạp chất mà, chỉ cần chúng ta dùng micropipette hút pha nước, vẫn sẽ hút phải protein."

Giang Hà trả lời: "Cho nên, rửa hai lần, phương pháp chiết xuất chloroform kép. Sau khi thêm chloroform lần đầu và ly tâm, hút dịch nổi, chuyển sang ống ly tâm mới, sau đó, vào phần dịch nổi vừa hút ra này, thêm một lần nữa chloroform với thể tích tương đương, lắc mạnh, tiến hành ly tâm lần hai. Nói một cách đơn giản, hy sinh lượng dịch lấy lần đầu để đổi lấy độ tinh khiết, sau đó thông qua việc thêm glycogen đồng kết tủa, kéo nồng độ trở lại."

Lúc này mọi người đã hiểu.

Vương Hiểu Tình thầm giơ ngón tay cái cho mình trong lòng.

—— Từ bỏ suy nghĩ, quả nhiên là chính xác.

—— Nghe theo Giang Hà là xong chuyện!

—— Chậc, nếu dự án nào cũng có một Giang Hà thì tốt biết mấy, sẽ không cần phải ngày nào cũng thức đêm rụng tóc trong phòng thí nghiệm nữa.

Giáo sư Hiểu Tình sắp sửa bước theo vết xe đổ của Dương Húc rồi.

Dương Húc cũng vậy, kể từ sau khi hợp tác với Giang Hà lên bàn mổ, liền rất muốn mỗi lần lên bàn mổ đều mang theo Giang Hà...

Các giáo sư cần phải nghiêm túc kiểm điểm lại hành vi quá mức ỷ lại vào Giang Hà này.

Thí nghiệm dưới phương án mới, bắt đầu lại.

Máy ly tâm lạnh tốc độ cao, đậy nắp, cài đặt thông số: 4 độ C, 12000g, 15 phút.

Lúc máy ly tâm hoạt động rất ồn.

Giang Hà tùy tiện tìm một cái ghế ngồi xuống, tiếp tục suy luận về nghiên cứu tiếp theo.

Vừa nãy cậu rời khỏi chỗ ra ngoài gọi một cuộc điện thoại, nói chuyện chính là về vấn đề huyết thanh.

"Yên tâm đi, Giang Hà, cô sẽ đi theo kênh nghiên cứu y học liên hợp quy cách cao của châu Âu, thông qua chuỗi cung ứng lạnh đá khô xuyên quốc gia để đặc cách vận chuyển hàng không huyết thanh của bệnh nhân giai đoạn cực sớm đến..."

Cô Cố nói ra lời này, thật khiến người ta an tâm.

Những người khác trong phòng thí nghiệm có chút căng thẳng, mọi người đều đang chờ đợi kết quả sau 15 phút này.

Dịch Hướng Vãn nhìn bóng lưng của Giang Hà, cảm giác an toàn đậm đặc lập tức dâng trào.

Dường như chỉ cần cậu ấy ở đây, tất cả các vấn đề chỉ là những điều chỉnh bước đơn giản...

Chắc hẳn vấn đề huyết thanh, sếp cũng nhất định có thể giải quyết được.

Quả thực là mình đã lo lắng thái quá rồi.

Nhưng Dịch Hướng Vãn không biết rằng.

Sự bình tĩnh của Giang Hà lúc này, rốt cuộc là đã trải qua những gì mới đổi lại được.

...

Công nghệ y tế lúc đó tiên tiến hơn năm 2008 rất nhiều.

Nhưng đối với Giang Hà mà nói, lại là một thời đại vô nghĩa.

Cô ấy đi rất nhanh, ung thư tuyến tụy giai đoạn cuối, từ lúc phát hiện đến lúc qua đời, đau đớn và ngắn ngủi.

Ba năm sau khi vợ mất, cậu gần như sống luôn trong phòng thí nghiệm.

Như phát điên mà tra cứu tài liệu, đi nghiên cứu các dấu ấn sớm của ung thư tuyến tụy.

Luôn nghĩ rằng, nếu có thể phát hiện sớm hơn một chút, có phải cô ấy sẽ không chết?

Sự cố chấp gần như bệnh hoạn, chống đỡ hơi tàn cuối cùng của cậu.

Lúc đó Giang Hà cũng đối mặt với vấn đề độ tinh khiết chiết xuất này.

Bộ kit lúc đó mặc dù dễ dùng, nhưng chi phí cực cao.

Hơn nữa đối với việc chiết xuất dấu ấn cực nhỏ vẫn chưa đủ ổn định.

Để tìm ra một hệ thống chiết xuất ổn định và chi phí có thể kiểm soát được, cậu đã tự mình mày mò.

Thêm bao nhiêu nồng độ glycogen? Nhiệt độ của máy ly tâm chênh lệch một độ C sẽ ra sao? Tốc độ quay tăng thêm 500g sẽ mang lại bao nhiêu sự phá hủy của lực cắt?

Cậu của kiếp trước, không có ai hướng dẫn.

Trong những lần báo lỗi dữ liệu hết lần này đến lần khác, trong từng ống mẫu vật bị bỏ đi, trong những đêm mất ngủ triền miên, đã ngưng tụ ra phương án hoàn hảo này.

Một vạn lần thất bại, mới đổi lấy một lần chỉ số ổn định.

Phòng thí nghiệm lúc đó rộng rãi hơn bây giờ, thiết bị tiên tiến hơn bây giờ, nhưng đó là nơi lạnh lẽo nhất mà cậu từng ở trong đời.

Cho nên bây giờ.

Ngày thu vừa đẹp.

Chỉ cần lấy ra đáp án chính xác từng khắc sâu trong xương tủy, giống như trên một bài toán, không chút do dự viết xuống lời giải duy nhất đó.

"Tít ——" Máy ly tâm ngừng quay.

Thái Trác Quần lập tức tiến lên, cẩn thận từng li từng tí, lấy ống ly tâm ra.

Dưới đáy ống, xuất hiện một lớp kết tủa màu trắng.

Sau khi thêm glycogen, đã kết tủa thành công phức hợp RNA.

Thêm nước không có enzyme để hòa tan.

Micropipette hút 1 microliter.

Nhỏ vào bệ NanoDrop.

Đo lường!

Dữ liệu mới xuất hiện.

Nồng độ: 14ng/ul.

A260/280: 1. 92.

A260/230: 2. 01.

Dữ liệu cực kỳ hoàn hảo!

Mặc dù nồng độ chỉ có mười mấy, nhưng đây đã là gấp vài lần phương pháp chiết xuất thông thường, quan trọng nhất là, độ tinh khiết của nó cực cao, đủ để hỗ trợ PCR phiên mã ngược ở hạ nguồn.

Vương Hiểu Tình hồi lâu không nói gì.

Cô biết trong điều kiện hiện tại, làm thủ công chiết xuất RNA huyết thanh đạt đến độ tinh khiết và nồng độ này, có ý nghĩa gì.

Điều này có nghĩa là sự kiểm soát nguyên lý và hiểu biết thông số đến mức tận cùng.

Điều này có nghĩa là, vài thay đổi bước mà Giang Hà tùy tiện nói ra, đã trực tiếp vượt qua thời gian mày mò vài năm của giới chuyên môn hiện tại.

Cô quay đầu, nhìn về phía Giang Hà.

Trên người cậu sinh viên hai mươi mốt tuổi này, Cô thậm chí còn nhìn thấy một loại áp bức nghiên cứu khoa học khiến người ta phải kính sợ.

Là một người theo chủ nghĩa vô thần, truyền thuyết về tiên gia trên người Giang Hà, bây giờ không thể không tin rồi...

Trần Hạo bình tĩnh nhất.

Cậu ta bị Giang Hà ra vẻ nhiều nhất, khả năng tự thích ứng đã kéo đầy.

Thế là bình tĩnh nói: "Giang Hà, độ tinh khiết qua ải rồi."

Giang Hà gật đầu, vừa viết vào sổ ghi chép thí nghiệm vừa nói: "Quy trình thao tác tiêu chuẩn của bước chiết xuất này cứ chốt theo cái này, tất cả các mẫu huyết thanh tiếp theo, toàn bộ chiết xuất theo quy trình chloroform kép thêm glycogen."

Giang Hà không quên khen một câu:

"Tiến độ tôi rất hài lòng, mọi người, vất vả rồi, tiếp tục đi, tôi phải đến bệnh viện một chuyến, công việc tiếp theo giao cho mọi người."

Mọi người đồng thanh đáp: "Đã nhận!"

Giang Hà rửa tay xong, hai tay đút túi, rời khỏi phòng thí nghiệm, đẹp trai không còn gì để nói.

Trong đầu cậu, thực ra có một thanh tiến độ rất rõ ràng.

[Tiến độ dự án tầm soát sớm ung thư tuyến tụy miRNA: 25%...] Quy trình chiết xuất được khắc phục, lại tăng thêm mười điểm phần trăm.

[Tiến độ dự án tầm soát sớm ung thư tuyến tụy miRNA: 35%...]